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产品目录

细菌膜蛋白提取亚博体育怎么样图片
产品货号:
HR0091
中文名称:
细菌膜蛋白提取亚博体育怎么样
英文名称:
Bacterial membrane protein extraction kit
产品规格:
50T|100T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
膜蛋白样品的制备需要充分考虑到与下游的胶分析及质谱分析等应用配套,因此膜蛋白样本制备成为一个难以逾越的挑战。传统制备膜蛋白样品的方法是使用去污剂和表面活性剂增溶。去污剂处理会使膜蛋白丧失其天然结构,因而妨碍了膜蛋白的功能研究。
细菌膜蛋白提取亚博体育怎么样是一种基于化学方法的高产膜蛋白提取亚博体育怎么样。细菌膜蛋白提取亚博体育怎么样可以从各种菌体中提取膜蛋白,可用于纯化蛋白的粗品制备及膜蛋白制备。提取过程简单方便。该亚博体育怎么样含有蛋白酶抑制剂混合物,阻止了蛋白酶对蛋白的降解,为提取高质量的蛋白提供了保证。该亚博体育怎么样提取的蛋白具有天然活性,可用于各种下游实验。

储存条件:蛋白酶抑制剂-20℃保存;蛋白提取液、溶解液2-8℃保存。
注:
●蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃保存,开盖使用后-20℃保存。
●蛋白酶抑制剂在2-8℃时是固体状态,从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
有效期:一年。

注意事项:
●本亚博体育怎么样仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

产品特点:
1.使用方便,从细菌中提取蛋白不需经过超声破碎等前处理。
2.含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。
3.紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。
4.蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂;每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。
该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性,包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
5.本品可用于革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
6.本品不含 EDTA,可以用于金属螯合层析等下游应用。

亚博体育怎么样以外自备试剂和仪器:
● 移液器、吸头 ●离心机及离心管 ● 涡旋混匀器、振荡器 ●冰箱,冰盒
使用注意事项:
● 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
● 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
●蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。
●可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

使用方法:
1.提取液制备:
每500μl冷的提取液A中加入5μl提取液B和2μl蛋白酶抑制剂混合物,充分混匀后置冰上备用。
【注】
● 根据需要处理的样品数量准备蛋白提取液,蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。
● 加过蛋白酶抑制剂的提取液一周内未使用,再次使用前需要再次加入蛋白酶抑制剂。
●蛋白样品用于测定某些蛋白酶活性等下游实验时,注意根据实际情况调整抑制剂混合物是否加入。
2.离心收集菌体,用PBS洗菌体2次。
3.按每100-150mg湿重菌体样本加入500μl冷的提取液A(大约菌体和提取液体积比1:3-1:5,完全淹没菌体即可),吹打混匀,在2-8℃振荡1-2小时,至菌体裂解完全,液体澄清,菌体沉淀减少。
【注】
● 必须在2-8℃条件下振荡,不可以室温振荡。
● 使用振荡器或摇床的较低转速,保持液体稍微晃动即可。可以盖紧离心管,将离心管倾斜放置或者横置,以利于液体振荡。
● 如果没有2-8℃持续振荡条件,也可直接置2-8℃冰箱静置1-2小时,中间每隔10分钟涡旋振荡混匀即可。
● 如果有超声条件,可以在40-300W,超声5s/间隔5s条件下超声几分钟,至澄清。
4.将菌液在2-8℃低温下12000g离心5分钟,取上清。
5.在37℃水浴10分钟。
6.在37℃,1000g离心3分钟。
【注】
● 此步骤必须37℃条件下离心。
● 如果离心机不可控温,可以不离心,延长上一步骤水浴时间,至溶液分层清晰即可。或者在室温条件下离心,缩短离心时间至1分钟。
7.此时液体分为2层,小心移除上层溶液,留管底部下层,大约50μl液体。
【注】
● 下层为粘稠液体。
● 未完全分好层时看上去可能像3层,保留中间的界面层即可。
8.用1-2倍体积的膜蛋白溶解液溶解该溶液,即得细菌膜蛋白样品。
9.将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
【注】
● 建议用BCA法进行蛋白定量。
●蛋白样品-80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉,不要被细菌污染。
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